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實驗室細胞培養中的「5M1E」

「5M1E」代表什麼?在細胞培養中有多重要?

  • 人(Man)
  • 機器(Machine)
  • 材料(Material)
  • 方法(Method)
  • 測量(Measurement)
  • 環境(Environment)






人(Man)

  • 人是處於中心位置和主導地位,其他「機」、「料」、「法」、「環」、「測」要素離開「人」也無法運轉。
  • 研究、生產、品質管理,以人為本,只有不斷提高人的素質,才能有序推進實驗結果、產品品質、組織品質、體系品質及其組合的實體品質的提高。
  • 只有具備良好素質、專業技能的研究人員去開展相關實驗研究,按照規定的程序完成研究、生產等過程,並在研究過程中減少對環境產生影響,整個實驗室或細胞房才會有良性的發展。
  • 建立良好、高效的人員管理規範制度,將合適的人才安排在工作崗位上:實驗室負責人、試劑耗材管理人、儀器設備監督人、值日生等。積極做好「傳、幫、帶」。
  • 定期開展工作匯報,制定實驗室緊急事件處理方案等。

細胞房內,人是最大的「污染源」

進入細胞房正確的穿衣順序:

  • 換專用鞋(拖鞋,定期清潔)
  • 無塵手套(避免不潔的雙手經穿著時粘附於無塵衣上)
  • 網帽/口罩(戴網帽時須確保頭髮不可暴露於網帽外,之後戴口罩遮住口鼻)
  • 無塵服(不要穿棉質衣服,容易脫落纖維)
  • 鞋套  






機器(Machine)


機器指實驗室中所存有的與各類實驗相關的儀器設備,可分類別管理,設置儀器管理負責人,做好使用、點檢、保養等工作。


  使用

  • 每個儀器設備建立規範的操作程序,並做好使用記錄;
  • 細胞房內區域設置合理,定期清潔,例如生物安全櫃、培養箱、顯微鏡、冰箱等要經常清潔。


  點檢

  • 按照規定程序對儀器進行狀態及性能的確認,及早發現異常;
  • 儀器出現異常要及時上報,並做好警示提醒,防止進一步的破壞。


  保養

  • 精密儀器、使用頻率高的儀器需要按照既定時間與程序進行檢修、保養;
  • 一旦實驗室發生微生物污染,應使用消毒液清潔儀器表面,並在水盤和水浴鍋中添加殺菌劑。






材料(Material)


材料指實驗室中所有與實驗相關的試劑、耗材、組織細胞、實驗動物等。應按照產品說明進行分類和正確儲存,並設置採購和倉庫管理人員,購買正品,確保良好管理。


  培養試劑

  • 應按照產品說明正確保存和使用;
  • 開封後的試劑應及時使用,部分產品應避免反復冷凍解凍以及質量下降;
  • 污染的培養試劑應經過消毒後再處理,不要直接倒入水池。


  耗材

  • 購買適用於細胞培養的耗材,正確儲存和使用;
  • 重複使用的耗材應注意清潔、完全滅菌以及效果測試;
  • 污染的耗材應及時清理出實驗室。






方法(Method)


方法指實驗室中涉及細胞相關實驗所遵循的標準程序或方法。無論是新人還是老練的人員,都需要按照程序/方法進行實驗研究,不斷優化實驗室細胞培養的標準操作程序(SOP)。


  1. 掌握細胞培養的基礎知識,熟悉實驗室的基本流程;
  2. 觀摩、練習細胞培養操作,包括復蘇、傳代、觀察和冷凍保存,並準確記錄實驗結果;
  3. 自主設計實驗方案,熟悉更多與細胞相關的實驗操作,使實驗結果可重複;
  4. 準確操作各種與細胞相關的實驗,制定符合實驗室相關SOP的操作程序。






測量(Measurement)


測量指實驗過程中保證實驗結果質量所涉及的試劑配製、溶液計量、儀器精密性與性能的測量。配置專門測量人員,確保公共試劑、公共儀器使用的準確度與精確性。


  • 按照正確流程配製試劑,調節pH、滲透壓,過濾,高壓滅菌等;
  • 公共試劑正確配製、保存、分裝使用;精密、使用頻率高的儀器進行準確校準與計量,保證實驗的準確性,並做好記錄與數據分析;
  • 定期對計量、校準的儀器進行保養、檢修,確保其他測量工作有序進行。






環境(Environment)


環境指實驗室系統的整體環境、實驗操作環境以及不同實驗操作之間的衔接環節。環境是保證實驗結果質量可控的前提,環節是每個步驟、程序衔接的重要控制點。


  整體環境

  • 不同潔淨級別的細胞房,環境標準會有所不同,各個區域設置合理;
  • 發生大規模污染時,根據實際條件進行全面消毒、清潔;
  • 定期做好清潔工作,定期更換消毒液。


  操作環境

  • 生物安全櫃/超淨台等操作環境都應符合細胞培養的無菌環境要求;
  • 發生污染時,實驗台面、培養箱、離心機顯微鏡台面等操作環境要進行準確消毒、清潔。


  保存環境

  • 確保試劑、耗材等材料的保存條件正確;
  • 污染試劑洩漏時,及時清潔保存環境,避免交叉污染;
  • 定期清理過期產品、長期不使用的產品等。








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